Ⅰ 我是WesternBlot 新手，做了一個多月都沒出來一張像樣的圖，背景總是很高雜帶太多，很鬧心跪求高手指教！
我感覺你一抗孵育時間過久，可嘗試下室溫孵育4h，抗體可用BSA稀釋，在孵育的過程中接著封閉，再者可能你洗膜太著急，洗的時間太短，做實驗還是要有耐心的，結果會回報你的 至於發光底物，其實國產的一點也不差，我們實驗室常用的是北京賽智創業的SageBrightness系列ECL底物，檢測靈敏度比Thermo還高些，儀器也用的這個公司的SmartChemi，一直都不錯。希望我的意見能幫到你，大家互相學習
Ⅱ photoshop怎麼處理Western
處理western blot 照片和其他照片沒什麼不一樣
主要就是要把一些過深的背景去除掉，僅僅保留條帶就可以了（千萬不要偽造條帶，學術造假很容易被查出來的）
photoshop中有圖像選項，其下拉菜單中有調整選項，由該選項可以拉出數個選項，其中一項是曲線，會出現一個對話框，該對話框的下部有三個並排的圖標，分別表示將圖像背景加深、適中、及變淺。將滑鼠點擊一下變淺的圖標，再到圖像的空白區域點一下就行了
Ⅲ Western blot試驗背景如何消除
染色時間不要太長，一般是1-2分鍾，但個人實驗經驗覺得1分鍾已經足夠啦！！！
Ⅳ 如何處理western blot的圖片的背景
可以試試在冰箱敷二抗，即和一抗一樣四度過夜，效果很好。
Ⅳ Western Blot發光實驗「背景太高」怎麼辦
做Western Blot發光實驗經常有「背景太高」問題的出現,要弄清「背景太高」的原因,先要知道「背景」是什麼,「背景」也是發光,影響發光的因素就會影響背景.
????影響發光的因素主要有：1.含HRP的抗體；2.發光試劑；3.和發光試劑反應的雜質,如含雜質的膜.這裡面,在很短時間內曝光造成的背景多是由於含HRP的抗體的因素造成的,抗體濃度過高,洗滌不充分,封閉不充分等都可以造成抗體在膜上的非特異結合,製造背景；轉移膜包括最後曝光時包裹的塑料薄膜,含有雜質也會製造背景,這種背景較容易發現鑒別.
值得注意的是,發光試劑不好,也會製造背景,這在較長時間曝光的情況下明顯,有人做過實驗,在較長曝光（30分鍾以上）,優質的發光試劑背景明顯較一般的發光試劑背景低,得到的圖像也更漂亮,結果也更可靠.
對一些實驗來說,如果實驗結果本應是多條帶,只是一些帶由於蛋白量多較強,短時曝光即可檢測,而另一些帶由於蛋白量相對較少,需要長時間曝光才可檢測,這時候主要的影響因素就是發光試劑,因為如果加大抗體的量,普通的發光試劑背景也會相應加大,影響較弱條帶的檢測,如果減少抗體的量,普通的發光試劑較弱條帶不易檢測,長時間曝光同樣隱藏在背景之中.這時如果不知道還有較弱條帶的存在,實驗的結論實際上被發光試劑影響了.如果有能長時間曝光而低背景的發光試劑,那麼得到的結果就會非常可靠.
所以,較好的抗體和實驗過程,再採用優質的發光試劑,就可以減少背景,得到漂亮、真實、可靠的發光結果.
其餘自己看：
Ⅵ 請問做Western Blot的大俠們，我最後顯影的膠片很臟，背景高咋整啊降了二抗的濃度，不好使啊
有幾個原因，第一就是二抗和一抗沒洗干凈，可以在洗膜液中多加些吐溫。
還有就是封閉的時間不夠，要不就22度30min到2h，要不就4度過夜。
Ⅶ Western實驗 曝光結果背景深可能的原因是什麼
需要多點說明給圖示，目的帶不是很亮，可以提高一下二抗濃度，曝光是化學顯色嗎？我之前都是曝光X膠片，時間都是很短就OK的。
是不是抗體的濃度太低了？覺得是背景深，壓片的時間可以減少。
增加上樣量，實在不行的話就調整一抗濃度。有時候目標蛋白的豐度不高，加上一抗的效價又不是很好的話，也是沒有太好的辦法的。手動曝光也需要點小技巧。手動暗室的曝光的效果沒有成像儀好，有條件的話，成像儀試試
Ⅷ western blot背景比較高，如何去除呢
二抗孵育時間短一點，洗膜時間長一點試試，關鍵是洗膜時間加長。
Ⅸ western blot 怎麼消除背景
1.用10%BSA或者10%全血清封閉。
2.孵育完抗體後要反復洗膜，多洗幾次。
3.選擇特異性高地抗體。
4.保持膜的濕潤，塗顯色底物時盡量塗均勻。如果你用的底物很靈敏，要少加。
Ⅹ 用photoshop調western blot色階是學術不端嗎
PS中用色階調整局部顏色，只需要先選中需要調節的部分，再使用色階命令即可，方法如下：選中需要調整的部分（下圖需要把背景調亮，選中鳥以外的部分）ctrl+L調出色階命令，調整如下參數。（調整時圖片會實時變化，便於參考）調整好參數點確定，最終效果如下，除鳥以外，其它地方變亮了很多。