⑴ 配製培養基有哪些步驟
培養基的配製步驟大方向一般有四步：
選擇原料。培養基不同成分的選擇，稱量，處理（比如瓊脂要剪碎，土豆要切塊等）
處理原料。如果是固體培養基需要煮培養基，加入不同成分煮沸，分裝試劑，液體培養基則溶解裝入錐形瓶或者試管。
滅菌處理。一般是濕熱滅菌，即在滅菌鍋中處理。
倒平板。培養基稍微冷卻後倒平板。
⑵ 配製培養基的步驟
1、配製溶液
向容器內加入所需水量的一部分，按照培養基的配方，稱取各種原料，依次加入使其溶解，最後補足所需水分。對蛋白腖、肉膏等物質，需加熱溶解，加熱過程所蒸發的水分，應在全部原料溶解後加水補足。
配製固體培養基時，先將上述已配好的液體培養基煮沸，再將稱好的瓊脂加入，繼續加熱至完全融化。並不斷攪拌，以免瓊脂糊底燒焦。
2、調節pH值
用pH試紙（或pH電位計、氫離子濃度比色計）測試培養基的pH值，如不符合需要，可用10%HCl或10%NaOH進行調節，直到調節到配方要求的pH值為止。
3、過濾
用濾紙、紗布或棉花趁熱將已配好的培養基過濾。用紗布過濾時，最好折疊成六層，用濾紙過濾時，可將濾紙折疊成瓦棱形，鋪在漏鬥上過濾。
4、分裝
已過濾的培養基應進行分裝。如果要製作斜面培養基，須將培養基分裝於試管中。如果要製作平板培養基或液體、半固體培養基，則須將培養基分裝於錐形瓶內。
分裝時，一手捏松彈簧夾，使培養基流出，另一隻手握住幾支試管或錐形瓶，依次接取培養基。分裝時，注意不要使培養基粘附管口或瓶口，以免浸濕棉塞引起雜菌污染。
裝入試管的培養基量，視試管和錐形瓶的大小及需要而定。一般製作斜面培養基時，每隻15×150毫米的試管，約裝3～4毫升（1/4～1/3試管高度），如製作深層培養基，每隻20×220毫米的試管約裝12～15毫升。每隻錐形瓶裝入的培養基，一般以其容積的一半為宜。
5、加棉塞
分裝完畢後，需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是過濾空氣，避免污染。棉塞應採用普通新鮮、乾燥的棉花製作，不要用脫脂棉，以免因脫脂棉吸水使棉塞無法使用。
製作棉塞時，要根據棉塞大小將棉花鋪展成適當厚度，揪取手掌心大小一塊，鋪在左手拇指與食指圈成的圓孔中，用右手食指插入棉花中部，同時左手食指與姆指稍稍緊握，就會形成1個長棒形的棉塞。
棉塞作成後，應迅速塞入管口或瓶口中，棉塞應緊貼內壁不留縫隙，以防空氣中微生物沿皺折侵入。棉塞不要過緊過松，塞好後，以手提棉塞、管、瓶不下落為合適。棉塞的2/3應在管內或瓶內，上端露出少許棉花便於拔取。塞好棉塞的試管和錐形瓶應蓋上厚紙用繩捆札，准備滅菌。
6、製作斜面培養基和平板培養基
培養基滅菌後，如製作斜面培養基和平板培養基，須趁培養基未凝固時進行。
(1)製作斜面培養基。在實驗台上放1支長0.5～1米左右的木條，厚度為1厘米左右。將試管頭部枕在木條上，使管內培養基自然傾斜，凝固後即成斜面培養基。
(2)製作平板培養基。將剛剛滅過菌的盛有培養基的錐形瓶和培養皿放在實驗台上，點燃酒精燈，右手托起錐形瓶瓶底，左手拔下棉塞，將瓶口在酒精燈上稍加灼燒，左手打開培養皿蓋，右手迅速將培養基倒入培養皿中，每皿約倒入10毫升，以鋪滿皿底為度。
鋪放培養基後放置15分鍾左右，待培養基凝固後，再5個培養皿一疊，倒置過來，平放在恆溫箱里，24小時後檢查，如培養基未長雜菌，即可用來培養微生物。
⑶ 製作培養基的步驟
1、配料：在容器中加入少量水，按照配方稱取各種葯品，加足所需水量（一葯一勺，取葯後立即蓋上瓶蓋）。
2、溶解：澱粉溶解：少量冷水調成糊狀，加熱溶解，特別是加有瓊脂的培養基，一定要煮沸，瓊脂的熔解溫度95-97℃ ，且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。
3、調PH：用1N的鹽酸或1N的 NaOH把培養基調節到所要求的值。
4、過濾：濾紙或棉花進行過濾。
5、分裝：一般培養基放在三角瓶或試管中滅菌使用。
⑷ 培養基的配製
培養基的配製：
1、稱量和熬煮
按培養基配方逐一稱取去皮土豆。土豆切成小塊放入鍋中，加水1000ml，在加熱器上加熱至沸騰，維持20-30min，用可用2層紗布趁熱在量杯上過濾，濾渣棄取。
2、加熱溶解
把濾液放入鍋中，加入葡萄糖20g，瓊脂15～20g(提前搞碎)，然後放在石棉網上，小火加熱，並用玻棒不斷攪拌，以防瓊脂糊底或溢出，待瓊脂完全溶解後，再補充水分至所需量。
3、分裝
按實訓要求，將配製的培養基分裝入試管或500ml三角瓶內。分裝時可用三角漏斗以免使培養基沾在管口或瓶口上造成污染。
4、加棉塞
培養基分裝完畢後，在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或試管帽等)，以阻止外界微生物進入培養基內造成污染，並保證有良好的通氣性能。
5、包紮
加塞後，將全部試管用麻繩或橡皮筋捆好，再在棉塞外包一層牛皮紙，以防止滅菌時冷凝水潤濕棉塞，其外再用一道線繩或橡皮筋紮好，用記號筆註明培養基名稱、組別、配製日期。
培養基配製注意事項：
1、培養基經滅菌後，必須放在37C溫箱培養24h，無菌生長者方可使用。
2、PDA培養基一般不需要調pH。對於要調節pH的培養基，一般用pH試紙測定其pH。如果培養基偏酸或偏鹼時，可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液進行調節。
3、調節時應逐滴加入NaOH或HCl溶液，防止局部過酸或過鹼破壞培養基成分。
4、培養基在使用時也可以做成不含瓊脂的液體培養基，用於菌類的震盪培養。
5、培養基也可以加入氯黴素或土黴素，加入量為0.2g/L培養基，主要是為了抑制細菌的生長，減少干擾性。
(4)在家做培養基步驟圖片擴展閱讀
培養基，是指供給微生物、植物或動物（或組織）生長繁殖的，由不同營養物質組合配製而成的營養基質。
一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽（包括微量元素）、維生素和水等幾大類物質。培養基既是提供細胞營養和促使細胞增殖的基礎物質，也是細胞生長和繁殖的生存環境。
培養基種類很多，根據配製原料的來源可分為自然培養基、合成培養基、半合成培養基。
根據物理狀態可分為固體培養基、液體培養基、半固體培養基；根據培養功能可分為基礎培養基、選擇培養基、加富培養基、鑒別培養基等。
根據使用范圍可分為細菌培養基、放線菌培養基、酵母菌培養基、真菌培養基等。培養基配成後一般需測試並調節pH，還須進行滅菌，通常有高溫滅菌和過濾滅菌。
培養基由於富含營養物質，易被污染或變質。配好後不宜久置，最好現配現用。
⑸ 怎樣自製培養基
自製培養基方法很多，根據材料，可以有針對性得去選擇：
( 1 ) PDA基本培養基：馬鈴薯200克、瓊脂20克、葡萄糖20克、水1，000毫升、pH值自然。
（2）PDA綜合培養基：馬鈴薯200克、瓊脂20克、葡萄糖20克、蛋白腖5克、磷酸二
氫鉀3克、硫酸鎂1.5克,維生素B12―4斤、水1,000毫升，pH自然。
這兩種培養基制備首先將馬鈴署去皮，洗凈，切成小塊，放入鍋中加水1,000毫升煮沸20分鍾，然後用紗布過濾取其汁液，將其它稱好的原料連同研碎的維生素B1放入濾液中，用清水補足1，000毫升，然後加熱使其溶化，用玻璃棒將培養基攪均，然後分裝試管。
（3）棉籽皮綜合培養基：棉籽皮200克、麩皮50克、瓊脂20克、葡萄糖20克、蛋白腖3克、磷酸二氫鉀3克、硫酸鎂1.5克、維生素B12－4片，水1，000毫升、pH值自然。
（4）木屑、麩皮培養基：木屑（闊葉樹）100克，麩皮50克、蛋白腖5克、磷酸二氫鉀3克、硫酸鎂2克、瓊脂20克、葡萄糖20克、水1，000毫升、pH值自然。
（5）麩皮培養基：麩皮100克，瓊脂20克，葡萄糖20克，蛋白腖3克，磷酸二氫鉀3克，硫酸鎂2克、水1，000毫升，pH值自然。
以上三種培養基的制備方法基本相同，首先將棉子皮，木屑或麩皮放入鍋中，加水1，000毫升水，加熱煮沸30分鍾，然後用四層紗布過濾，取出過濾液，加入其它原料，補足1，000毫升液體，再加熱使各材料溶化後即可。
⑹ 如何做細菌培養基。詳細材料及步驟有那些
先將標本接種於固體培養基上，做分離培養。再進一步對所得單個菌落進行形態、生化及血清學反應鑒定。培養基常用牛肉湯、蛋白腖、氯化鈉、葡萄糖、血液等和某些細菌所需的特殊物質配製成液體、半固體、固體等。一般細菌可在有氧條件下，37℃中放18～24小時生長。厭氧菌則需在無氧環境中放2～3天後生長。個別細菌如結核菌要培養1個月之久。
由於細菌無處不在，因此從制備培養基時開始，整個培養過程必須按無菌操作要求進行，否則外界細菌污染標本，會導致錯誤結果；而培養的致病菌一旦污染環境，就會引起交叉感染。
以疾病診斷為目的進行的培養，要選擇合適的標本（血、尿、便、膿液、分泌物等），並應結合臨床情況解釋所得結果。
⑺ PDA培養基的配製方法是什麼
1、熬煮
取大約200g左右的土豆，去掉外皮切成小塊放入鍋中，加入1000毫升水，煮沸。
以上步驟就是PDA培養基的配製方法。
⑻ LB培養基如何配製
以配製一升培養基為例：
應該在950 ml去離子水中加入:
胰蛋白腖10g
酵母提取物5g
NaCl 10g
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配置原則：
1、選擇適宜的營養物質
就微生物主要類型而言，有細菌、放線菌、酵母菌、黴菌、原生動物、藻類及病毒之分，培養它們所需的培養基各不相同。
在實驗室中常用牛肉膏蛋白腖培養基(或簡稱普通肉湯培養基)培養細菌，用高氏I號合成培養基培養放線菌，培養酵母菌一般用麥芽汁培養基，培養黴菌則一般用查氏合成培養基。
2、營養物質濃度及配比合適
培養基中營養物質濃度合適時微生物才能生長良好，營養物質濃度過低時不能滿足微生物正常生長所需，濃度過高時則可能對微生物生長起抑製作用。
另外，培養基中各營養物質之間的濃度配比也直接影響微生物的生長繁殖和(或)代謝產物的形成和積累，其中碳氮比(C/N)的影響較大。嚴格地講，碳氮比指培養基中碳元素與氮元素的物質的量比值，有時也指培養基中還原糖與粗蛋白之比。
3、控制pH條件
培養基的pH必須控制在一定的范圍內，以滿足不同類型微生物的生長繁殖或產生代謝產物。各類微生物生長繁殖或產生代謝產物的最適pH條件各不相同，一般來講，細菌與放線菌適於在pH7-7.5范圍內生長，酵母菌和黴菌通常在pH4.5-6范圍內生長。
值得注意的是，在微生物生長繁殖和代謝過程中，由於營養物質被分解利用和代謝產物的形成與積累，會導致培養基pH發生變化，若不對培養基pH條件進行控制，往往導致微生物生長速度下降或(和)代謝產物產量下降。
4、控制氧化還原電位(redox potential)
不同類型微生物生長對氧化還原電位(F)的要求不一樣，一般好氧性微生物在F值為+0.1V以上時可正常生長，一般以+0.3一+0.4V為宜，厭氧性微生物只能在F值低於+0.1V條件下生長，兼性厭氧微生物在F值為+0.1V以上時進行好氧呼吸，在+0.1V以下時進行發酵。
5、原料來源的選擇
在配製培養基時應盡量利用廉價且易於獲得的原料作為培養基成分，特別是在發酵工業中，培養基用量很大，利用低成本的原料更體現出其經濟價值。
6、滅菌處理
要獲得微生物純培養，必須避免雜菌污染，因此對所用器材及工作場所進行消毒與滅菌。對培養基而言，更是要進行嚴格的滅菌。對培養基一般採取高壓蒸汽滅菌，一般培養基用1.05kg/cm2，121.3℃條件下維持15-30min可達到滅菌目的。
在配製培養基過程中，泡沫的存在對滅菌處理極不利，因為泡沫中的空氣形成隔熱層，使泡沫中微生物難以被殺死。因而有時需要在培養基中加入消泡沫劑以減少泡沫的產生，或適當提高滅菌溫度。
⑼ PDA培養基,牛肉膏蛋白腖培養基的配方
1.PDA培養基是人們對馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基的簡稱，即Potato Dextrose Agar （Medium），依次對應馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂的英文。
配方：
馬鈴薯 200克 葡萄糖 20克
瓊脂 15~20克 蒸餾水1000毫升
自然PH
2.牛肉膏蛋白腖培養基牛肉膏蛋白腖瓊脂培養基是一種應用十分廣泛的天然培養基，其中的牛肉膏為微生物提供碳源、磷酸鹽和維生素，蛋白腖主要提供氮源和維生素，NaCl提供無機鹽
配方：
牛肉膏:3.0g
蛋白腖:10.0g
NaCl:5.0g
瓊脂:15-25g
水:1000ml
pH:7.4-7.6
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PAD培養基的配製步驟
其做法是先洗凈去皮,再稱取200g馬鈴薯切成小塊，加水煮爛（煮沸20~30分鍾，能被玻璃棒戳破即可），用八層紗布過濾，加熱，再據實際實驗需要加15-20g瓊脂，繼續加熱攪拌混勻
待瓊脂溶解完後，加入葡萄糖，攪拌均勻，稍冷卻後再補足水分至1000毫升，分裝試管或者錐形瓶，加塞、包紮，（115℃）滅菌20分鍾左右後取出試管擺斜面或者搖勻，冷卻後貯存備用。
⑽ 新人請問培養基怎麼做
培養基（Medium）是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配製的養料,一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽（包括微量元素）以及維生素和水等.有的培養基還含有抗菌素和色素.
按所用原料不同,可分為兩類：應用肉湯、馬鈴薯汁等天然成分配製的,稱為天然培養基；應用化學葯品配成並標明成分的,稱為合成培養基或綜合培養基.化學試劑中的培養基,大多為合成培養基.由於液體培養基不易長期保管,現在均改製成粉末.培養基由於配製的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同.一般培養基在受熱、吸潮後,易被細菌污染或分解變質,因此一般培養基必須防潮、避光、陰涼處保存.對一些需嚴格滅菌的培養基（如組織培養基）,較長時間的貯存,必須放在2~6.C的冰箱內.
常見培養基有：
1、細菌培養基
配方一 牛肉膏瓊脂培養基
牛肉膏0.3克 ,蛋白腖1.0克,氯化鈉 0.5克,瓊脂 1.5克,
水 100毫升
在燒杯內加水100毫升,放入牛肉膏、蛋白腖和氯化鈉,用蠟筆在燒杯外作上記號後,放在火上加熱.待燒杯內各組分溶解後,加入瓊脂,不斷攪拌以免粘底.等瓊脂完全溶解後補足失水,用10%鹽酸或10%的氫氧化鈉調整pH值到7.2～7.6,分裝在各個試管里,加棉花塞,用高壓蒸汽滅菌30分鍾.
配方二 馬鈴薯培養基
取新鮮牛心（除去脂肪和血管）250克,用刀細細剁成肉末後,加入500毫升蒸餾水和5克蛋白腖.在燒杯上做好記號,煮沸,轉用文火燉2小時.過濾,濾出的肉末乾燥處理,濾液pH值調到7.5左右.每支試管內加入10毫升肉湯和少量碎末狀的干牛心,滅菌,備用.
配方三 根瘤菌培養基
葡萄糖 10克 磷酸氫二鉀 0.5克
碳酸鈣 3克 硫酸鎂 0.2克
酵母粉 0.4克 瓊脂 20克
水 1000毫升 1%結晶紫溶液 1毫升
先把瓊脂加水煮沸溶解,然後分別加入其他組分,攪拌使溶解後,分裝,滅菌,備用.
2、放線菌培養基
配方一 澱粉瓊脂培養基（高氏培養基）
可溶性澱粉 2克 硝酸鉀 0.1克
磷酸氫二鉀 0.05克 氯化鈉 0.05克
硫酸鎂 0.05克 硫酸亞鐵 0.001克
瓊脂 2克 水 100毫升
先把澱粉放在燒杯里,用5毫升水調成糊狀後,倒入95毫升水,攪勻後加入其他葯品,使它溶解.在燒杯外做好記號,加熱到煮沸時加入瓊脂,不停攪拌,待瓊脂完全溶解後,補足失水.調整pH值到7.2～7.4,分裝後滅菌,備用.
配方二 麵粉瓊脂培養基
麵粉 60克 瓊脂 20克
水 1000毫升
把麵粉用水調成糊狀,加水到500毫升,放在文火上煮30分鍾.另取500毫升水,放入瓊脂,加熱煮沸到溶解後,把兩液調勻,補充水分,調整pH值到7.4,分裝,滅菌,備用.
3、真菌培養基
配方一 薩市（Sabouraud』s）培養基
蛋白腖 10克 瓊脂 20克
麥芽糖 40克 水 1000毫升
先把蛋白腖、瓊脂加水後,加熱,不斷攪拌,待瓊脂溶解後,加入40克麥芽糖（或葡萄糖）,攪拌,使它溶解,然後分裝,滅菌,備用.
本培養菌是培養許多種類真菌所常用的.
配方二 馬鈴薯糖瓊脂培養基
把馬鈴薯洗凈去皮,取200克切成小塊,加水1000毫升,煮沸半小時後,補足水分.在濾液中加入10克瓊脂,煮沸溶解後加糖20克（用於培養黴菌的加入蔗糖,用於培養酵母菌的加入葡萄糖）,補足水分,分裝,滅菌,備用.
把這培養基的pH值調到7.2～7.4,配方中的糖,如用葡萄糖還可用來培養放線菌和芽孢桿菌.
配方三 黃豆芽汁培養基
黃豆芽 100克 瓊脂 15克
葡萄糖 20克 水 1000毫升
洗凈黃豆芽,加水煮沸30分鍾.用紗布過濾,濾液中加入瓊脂,加熱溶解後放入糖,攪拌使它溶解,補足水分到1000毫升,分裝,滅菌,備用.
把這培養基的pH值調到7.2～7.4,可用來培養細菌和放線菌.
配方四 豌豆瓊脂培養基
豌豆 80粒 瓊脂 5克
水 200毫升
取80粒干豌豆加水,煮沸1小時,用紗布過濾後,在濾液中加入瓊脂,煮沸到溶解,分裝,滅菌,備用.
4、食用菌菌種培養基
配方一 馬鈴薯—蔗糖--瓊脂培養基
20%馬鈴薯煮汁 1000毫升
蔗糖 20克 瓊脂 18克
把馬鈴薯洗凈去皮後,切成小塊.稱取馬鈴薯小塊200克,加水1000毫升,煮沸20分鍾後,過濾.在濾汁中補足水分到1000毫升,即成20%馬鈴薯煮汁.在馬鈴薯煮汁中加入瓊脂和蔗糖,煮沸,使它溶解後,補足水分,分裝,滅菌,備用.使用該培養基對pH值要求不嚴格,可以不測定.
配方二 綜合馬鈴薯培養基
20%馬鈴薯煮汁 1000 毫升
磷酸二氫鉀 3克 硫酸鎂 1.5克
葡萄糖 20克 維生素 10毫克
瓊脂 18克
先配製20%馬鈴薯煮汁,方法同上.在煮汁中加入上述各種組分,加熱溶解後補足水分,調整pH值到6.分裝,滅菌,備用. 該培養基用於培養和保存靈芝、平菇、香菇等食用菌菌種.
5.煙草的培養基
在植物組織培養時,通過調節IAA和CTK的比值能影響愈傷組織分化出根或芽.CTK/IAA高時,愈傷組織分化芽
CTK/IAA低時,分化根;CTK/IAA比例適中維持愈傷組織不分化
愈傷組織誘導培養基制備
以MS培養基母液為基礎,向潔凈鋁鍋中順序加入大量元素20×母液100mL,微量元素100×母液20mL,鐵鹽100×母液20mL ,維生素100×母液20mL,肌醇200×母液10mL,甘氨酸200×母液10mL,配製得MS培養基後,再加入0.5mg·L-1的BA8mL,0.5mg·L-1的NAA8mL.然後加入實際配製培養基體積約2/3-3/4的蒸餾水,加入40g蔗糖後攪拌使其溶化,用0.5mol·L-1的NaOH和0.5 mol·L-1的HCl調整pH值至5.8-6.0.加入14g瓊脂,將鋁鍋置於電爐上,攪拌加熱使瓊脂完全溶化,然後用蒸餾水定容至終體積2L,繼續加熱幾分鍾使之混合均勻後分裝於三角瓶中.
愈傷組織誘導的總體情況
煙草愈傷組織誘導培養4周後,愈傷組織基本形成,即排除因生長時間不夠而
未形成愈傷的情況.具體情況見表一中所示,6瓶培養物均有愈傷形成,且都未發
生污染,但誘導率幾乎各不相同.其中, 在光照條件下培養的3瓶平均愈傷誘導率為
60.0℅, 在黑暗條件下培養的3瓶平均愈傷誘導率為46.7%.由於實驗過程中,外植
體即煙草葉片取得偏小,接種時可能已有部分外植體的大部分細胞脫水死亡,使整
個實驗的愈傷組織誘導率偏低,愈傷塊偏小.
特殊培養基：
一 選擇性培養基
1酵母菌富集培養基
葡萄糖5% 尿素0.1% 硫化銨0.1% 磷酸二氫鉀0.25% 磷酸氫二鈉0.05% 七水合硫酸鎂0.1% 七水合硫酸鐵0.01% 酵母膏0.05%
孟加拉紅0.003% pH4.5
2 Ashby無氮培養基 富集好養自生固氮菌
甘露醇1% 磷酸二氫鉀0.02% 七水合硫酸鎂0.02% 氯化鈉0.02%
二水合硫酸鈣0.01% 碳酸鈣0.5%
二 鑒別培養基
EMB培養基,常用於鑒別E.coli
蛋白腖 10g 乳糖5g 蔗糖5g 磷酸氫二鉀2g 伊紅Y 0.4g 美藍0.065g
蒸餾水1000g pH7.2
分離海洋微生物的培養基配方
2216E培養基配方（固體培養基）
蛋白腖 5克
酵母膏 1克
磷酸高鐵 0.01克
瓊脂 15-----20克
陳海水 1000毫升
煮沸氫氧化納（5%）的溶液調PH值7.6—7.8