A. 請教一些關於DAPI染色的問題，急
DAPI肯定是藍色
DAPI相對很容易染上色，避光處理時加樣等操作短時見光沒有關系的，但是不操作的時候需要暗盒或錫紙包裹。
B. DAPI 染色為什麼出現綠色熒光
是非特異性染色吧，一般DAPI孵育後要漂洗，再曝光。用紫外光激發。你是不是用錯激發光源了？
C. dapi染色能否區分活死細胞
DAPI染色不能區分活死細胞，因為DAPI可以透過完整的細胞膜，它可以用於活細胞和固定細胞的染色。活細胞死細胞都能夠被DAPI染色，所以光看到藍色熒光，無法區分。
DAPI是一種能夠與DNA強力結合的熒光染料，常用於熒光顯微鏡觀測。類似於DAPI技術，赫斯特染色是一種既可以用於活細胞也可以用於固定細胞的藍色熒光染料，並且可以使用與DAPI相同的機器濾鏡設置。
(3)細胞dapi染色後的熒光圖片顏色擴展閱讀：
原理：
DAPI 是一種能夠與DNA強力結合的熒光染料。它結合到雙鏈DNA小溝的AT鹼基對處，一個DAPI分子可以占據三個鹼基對的位置。結合到雙鏈DNA上DAPI分子的熒光強度提高大約20倍，常用與熒光顯微鏡觀測，根據熒光的強度可以確定DNA的量。
歷史背景：
1971年DAPI在一項關於制抗錐蟲病的葯物的研究中第一次被合成於OttoDann的實驗室。它雖然不是一種成功的葯物，但更深入的研究表明它與DNA強力結合並在此時發出更強的熒光，這導致了1975年它被用在超速離心分析法中以標記線粒體DNA。
與DNA結合時激發的強熒光使它被廣泛用於熒光顯微鏡技術中對DNA的染色。上世紀70年代末證實DAPI可以被用來在植物，微生物，多細胞動物和細菌細胞中追蹤DNA，1977年證實它可以被用來定量給細胞中的DNA染色，同時也證實DAPI可在流式細胞術中用作DNA染料。
D. 熒光顯微鏡觀察細胞凋亡為什麼用dapi不用pi
原理不同：DAPI染的是雙鏈DNA，PI染的是DNA和RNA。PI可以把細胞漿中的非特異性核酸，比如RNA也染上顏色。所以這個時候可以先用RNA酶處理一下。
2.顏色不同，DAPI在熒光顯微鏡看到的是紫藍的光，PI則顯示桔紅色的光芒。
前段時間剛染過，我還是喜歡DAPI的光。顯微鏡下可以看到顯藍色熒光的細胞，熒光顯微鏡觀察細胞標記的效率高(幾乎為100 %) ，且對活細胞無毒副作用。DAPI染色常用於細胞凋亡檢測，染色後用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。
E. 免疫熒光染色中的綠色和藍色各表示什麼
藍色代表DAPI染色，綠色代表Pax7免疫熒光染色。
在生物科研或病理領域，有一類片子叫熒光染色（免疫熒光），通過對不同的組織進行不同的光學處理，使得最終的片子中，不同的光色對應不同的組織。
細胞分割計數針對的是藍色通道的圖像，我們的數據部門對藍色通道約幾百張圖片准備了數據標簽分別嘗試了Mask-RCNN和solov2，後來發現在我們這種小而密集的場景下還是mask-rcnn比較穩定，實際應用中我們用到了更小的放大倍率下，所以細胞更小更密集，所以模型的top_k比較大。
F. 有關細胞生物的問題
這是一張細胞熒光圖，DAPI（4',6-diamidino-2-phenylindole）是一種細胞核的染料（染A-T富集區），顯示細胞核的位置；p-H3（phospho-histone H3）是一種多克隆抗體，可以識別組蛋白H3；GFP(Green fluorescent protein)就是綠色熒光蛋白，圖中的GFP應該是細胞中轉染的載體帶有綠色熒光蛋白；Merge的意思是融合，就是把前三張熒光圖片合並在一起看的效果。這個圖可能是用四種不同的載體轉染細胞（GFP是對照），十小時後用熒光顯微鏡觀察細胞的各種熒光染色的情況。
G. 活死細胞dapi染色觀察到藍色熒光是活細胞還是死細
活死細胞dapi染色觀察到藍色熒光是活細胞
因為DAPI可以透過完整的細胞膜，DAPI能快速進入活細胞中與DNA結合，它可以用於活細胞和固定細胞的染色。
DAPI染色原理：
DAPI 為一種熒光染料，可以穿透細胞膜與細胞核中的雙鏈DNA結合而發揮標記的作用，可以產生比DAPI自身強20多倍的熒光，和EB相比，對雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。顯微鏡下可以看到顯藍色熒光的細胞，熒光顯微鏡觀察細胞標記的效率高(幾乎為100 %) 。DAPI染色常用於細胞凋亡檢測，染色後用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。DAPI也常用於普通的細胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色。細胞經熱激處理後用DAPI染色3分鍾，在熒光顯微鏡下可以看到到細胞核的形態變化。
a、 正常的煙草細胞核：核形完整，染色質均勻。
b、染色質固縮，向外周聚集，形成周邊化。
c、 染色質進一步固縮，形成很多顆粒物質。
d、 細胞核破裂形成碎片，核解體。