Ⅰ 我是WesternBlot 新手，做了一个多月都没出来一张像样的图，背景总是很高杂带太多，很闹心跪求高手指教！
我感觉你一抗孵育时间过久，可尝试下室温孵育4h，抗体可用BSA稀释，在孵育的过程中接着封闭，再者可能你洗膜太着急，洗的时间太短，做实验还是要有耐心的，结果会回报你的 至于发光底物，其实国产的一点也不差，我们实验室常用的是北京赛智创业的SageBrightness系列ECL底物，检测灵敏度比Thermo还高些，仪器也用的这个公司的SmartChemi，一直都不错。希望我的意见能帮到你，大家互相学习
Ⅱ photoshop怎么处理Western
处理western blot 照片和其他照片没什么不一样
主要就是要把一些过深的背景去除掉，仅仅保留条带就可以了（千万不要伪造条带，学术造假很容易被查出来的）
photoshop中有图像选项，其下拉菜单中有调整选项，由该选项可以拉出数个选项，其中一项是曲线，会出现一个对话框，该对话框的下部有三个并排的图标，分别表示将图像背景加深、适中、及变浅。将鼠标点击一下变浅的图标，再到图像的空白区域点一下就行了
Ⅲ Western blot试验背景如何消除
染色时间不要太长，一般是1-2分钟，但个人实验经验觉得1分钟已经足够啦！！！
Ⅳ 如何处理western blot的图片的背景
可以试试在冰箱敷二抗，即和一抗一样四度过夜，效果很好。
Ⅳ Western Blot发光实验“背景太高”怎么办
做Western Blot发光实验经常有“背景太高”问题的出现,要弄清“背景太高”的原因,先要知道“背景”是什么,“背景”也是发光,影响发光的因素就会影响背景.
????影响发光的因素主要有：1.含HRP的抗体；2.发光试剂；3.和发光试剂反应的杂质,如含杂质的膜.这里面,在很短时间内曝光造成的背景多是由于含HRP的抗体的因素造成的,抗体浓度过高,洗涤不充分,封闭不充分等都可以造成抗体在膜上的非特异结合,制造背景；转移膜包括最后曝光时包裹的塑料薄膜,含有杂质也会制造背景,这种背景较容易发现鉴别.
值得注意的是,发光试剂不好,也会制造背景,这在较长时间曝光的情况下明显,有人做过实验,在较长曝光（30分钟以上）,优质的发光试剂背景明显较一般的发光试剂背景低,得到的图像也更漂亮,结果也更可靠.
对一些实验来说,如果实验结果本应是多条带,只是一些带由于蛋白量多较强,短时曝光即可检测,而另一些带由于蛋白量相对较少,需要长时间曝光才可检测,这时候主要的影响因素就是发光试剂,因为如果加大抗体的量,普通的发光试剂背景也会相应加大,影响较弱条带的检测,如果减少抗体的量,普通的发光试剂较弱条带不易检测,长时间曝光同样隐藏在背景之中.这时如果不知道还有较弱条带的存在,实验的结论实际上被发光试剂影响了.如果有能长时间曝光而低背景的发光试剂,那么得到的结果就会非常可靠.
所以,较好的抗体和实验过程,再采用优质的发光试剂,就可以减少背景,得到漂亮、真实、可靠的发光结果.
其余自己看：
Ⅵ 请问做Western Blot的大侠们，我最后显影的胶片很脏，背景高咋整啊降了二抗的浓度，不好使啊
有几个原因，第一就是二抗和一抗没洗干净，可以在洗膜液中多加些吐温。
还有就是封闭的时间不够，要不就22度30min到2h，要不就4度过夜。
Ⅶ Western实验 曝光结果背景深可能的原因是什么
需要多点说明给图示，目的带不是很亮，可以提高一下二抗浓度，曝光是化学显色吗？我之前都是曝光X胶片，时间都是很短就OK的。
是不是抗体的浓度太低了？觉得是背景深，压片的时间可以减少。
增加上样量，实在不行的话就调整一抗浓度。有时候目标蛋白的丰度不高，加上一抗的效价又不是很好的话，也是没有太好的办法的。手动曝光也需要点小技巧。手动暗室的曝光的效果没有成像仪好，有条件的话，成像仪试试
Ⅷ western blot背景比较高，如何去除呢
二抗孵育时间短一点，洗膜时间长一点试试，关键是洗膜时间加长。
Ⅸ western blot 怎么消除背景
1.用10%BSA或者10%全血清封闭。
2.孵育完抗体后要反复洗膜，多洗几次。
3.选择特异性高地抗体。
4.保持膜的湿润，涂显色底物时尽量涂均匀。如果你用的底物很灵敏，要少加。
Ⅹ 用photoshop调western blot色阶是学术不端吗
PS中用色阶调整局部颜色，只需要先选中需要调节的部分，再使用色阶命令即可，方法如下：选中需要调整的部分（下图需要把背景调亮，选中鸟以外的部分）ctrl+L调出色阶命令，调整如下参数。（调整时图片会实时变化，便于参考）调整好参数点确定，最终效果如下，除鸟以外，其它地方变亮了很多。