A. 请教一些关于DAPI染色的问题，急
DAPI肯定是蓝色
DAPI相对很容易染上色，避光处理时加样等操作短时见光没有关系的，但是不操作的时候需要暗盒或锡纸包裹。
B. DAPI 染色为什么出现绿色荧光
是非特异性染色吧，一般DAPI孵育后要漂洗，再曝光。用紫外光激发。你是不是用错激发光源了？
C. dapi染色能否区分活死细胞
DAPI染色不能区分活死细胞，因为DAPI可以透过完整的细胞膜，它可以用于活细胞和固定细胞的染色。活细胞死细胞都能够被DAPI染色，所以光看到蓝色荧光，无法区分。
DAPI是一种能够与DNA强力结合的荧光染料，常用于荧光显微镜观测。类似于DAPI技术，赫斯特染色是一种既可以用于活细胞也可以用于固定细胞的蓝色荧光染料，并且可以使用与DAPI相同的机器滤镜设置。
(3)细胞dapi染色后的荧光图片颜色扩展阅读：
原理：
DAPI 是一种能够与DNA强力结合的荧光染料。它结合到双链DNA小沟的AT碱基对处，一个DAPI分子可以占据三个碱基对的位置。结合到双链DNA上DAPI分子的荧光强度提高大约20倍，常用与荧光显微镜观测，根据荧光的强度可以确定DNA的量。
历史背景：
1971年DAPI在一项关于制抗锥虫病的药物的研究中第一次被合成于OttoDann的实验室。它虽然不是一种成功的药物，但更深入的研究表明它与DNA强力结合并在此时发出更强的荧光，这导致了1975年它被用在超速离心分析法中以标记线粒体DNA。
与DNA结合时激发的强荧光使它被广泛用于荧光显微镜技术中对DNA的染色。上世纪70年代末证实DAPI可以被用来在植物，微生物，多细胞动物和细菌细胞中追踪DNA，1977年证实它可以被用来定量给细胞中的DNA染色，同时也证实DAPI可在流式细胞术中用作DNA染料。
D. 荧光显微镜观察细胞凋亡为什么用dapi不用pi
原理不同：DAPI染的是双链DNA，PI染的是DNA和RNA。PI可以把细胞浆中的非特异性核酸，比如RNA也染上颜色。所以这个时候可以先用RNA酶处理一下。
2.颜色不同，DAPI在荧光显微镜看到的是紫蓝的光，PI则显示桔红色的光芒。
前段时间刚染过，我还是喜欢DAPI的光。显微镜下可以看到显蓝色荧光的细胞，荧光显微镜观察细胞标记的效率高(几乎为100 %) ，且对活细胞无毒副作用。DAPI染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。
E. 免疫荧光染色中的绿色和蓝色各表示什么
蓝色代表DAPI染色，绿色代表Pax7免疫荧光染色。
在生物科研或病理领域，有一类片子叫荧光染色（免疫荧光），通过对不同的组织进行不同的光学处理，使得最终的片子中，不同的光色对应不同的组织。
细胞分割计数针对的是蓝色通道的图像，我们的数据部门对蓝色通道约几百张图片准备了数据标签分别尝试了Mask-RCNN和solov2，后来发现在我们这种小而密集的场景下还是mask-rcnn比较稳定，实际应用中我们用到了更小的放大倍率下，所以细胞更小更密集，所以模型的top_k比较大。
F. 有关细胞生物的问题
这是一张细胞荧光图，DAPI（4',6-diamidino-2-phenylindole）是一种细胞核的染料（染A-T富集区），显示细胞核的位置；p-H3（phospho-histone H3）是一种多克隆抗体，可以识别组蛋白H3；GFP(Green fluorescent protein)就是绿色荧光蛋白，图中的GFP应该是细胞中转染的载体带有绿色荧光蛋白；Merge的意思是融合，就是把前三张荧光图片合并在一起看的效果。这个图可能是用四种不同的载体转染细胞（GFP是对照），十小时后用荧光显微镜观察细胞的各种荧光染色的情况。
G. 活死细胞dapi染色观察到蓝色荧光是活细胞还是死细
活死细胞dapi染色观察到蓝色荧光是活细胞
因为DAPI可以透过完整的细胞膜，DAPI能快速进入活细胞中与DNA结合，它可以用于活细胞和固定细胞的染色。
DAPI染色原理：
DAPI 为一种荧光染料，可以穿透细胞膜与细胞核中的双链DNA结合而发挥标记的作用，可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光，和EB相比，对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。显微镜下可以看到显蓝色荧光的细胞，荧光显微镜观察细胞标记的效率高(几乎为100 %) 。DAPI染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。细胞经热激处理后用DAPI染色3分钟，在荧光显微镜下可以看到到细胞核的形态变化。
a、 正常的烟草细胞核：核形完整，染色质均匀。
b、染色质固缩，向外周聚集，形成周边化。
c、 染色质进一步固缩，形成很多颗粒物质。
d、 细胞核破裂形成碎片，核解体。