❶ 大肠菌群实验步骤
1. 稀释水样：取0.5ml水样加入4.5ml无菌水中，制成10-1水样稀释液；2.初发酵试验：取10ml水样接入到10ml双料乳糖蛋白胨培养液中（内有倒管） ，取1ml水样接入到10ml单料乳糖蛋白胨培养液中，取1ml 10-1水样接入到10ml单料乳糖蛋白胨培养液中，每个稀释度做5个重复，混匀后置于37℃恒温箱内培养24h。 3.平板分离：将产酸、产气及只产酸的发酵管分别接种于伊红美蓝培养基上，置于37℃恒温箱内培养24h，挑选符合下列特征的菌落进行革兰氏染色、镜检：深紫黑色，具有金属光泽的菌落；紫黑色，不带或略带金属光泽的菌落；淡紫红色，中心色较深的菌落 。
❷ 大肠菌群的检验是比较常见的微生物检验，但谁能给个详细的操作步骤或者图片啊，越详细越好！
在这里有比较详细的，大肠菌群显色培养基是青岛海博生物公司改良的培养基，用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大肠菌群的快速检测。大肠菌群显蓝绿色，其它菌显黄色或无色，革兰氏阳性菌被抑制。
成份 (g/L)
特殊营养物质 47.55
显色剂 0.35
琼脂 13.0
pH 7.0-7.2 25 ℃
此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最佳的结果。
注意
此培养基仅供实验室使用。
用法
称取本品 47.9g 加入 1000ml 蒸馏水，加热溶解并不停搅拌，煮沸不要超过 1 分钟。分装三角瓶， 116 ℃ 高压灭菌 15 分钟。取 1ml 制备好的样品液加入直径为 9cm 无菌平皿中心，倾入冷却至 45 -50 ℃ 培养基约15ml ，混匀，凝固后， 36 ± 1 ℃ 倒置培养 18 ～ 24h 。或冷却至 45-50 ℃时，倾入无菌平皿，琼脂完全凝固后，在 37 ℃的培养箱中倒置放置 1-2 小时，加入适当稀释度的样品液 1ml ，涂布于培养基上， 36 ± 1 ℃培养 18 ～ 24h 。
贮存
制备好的平板应立即使用，应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处， 保存温度 2-8 ℃，注意避光保存。
失效
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
操作步骤
1 、按国家标准、 SN 标准、 FDA 标准或其它方法制备样品液
2 、取样品液 1ml 加入 冷却至 45-50 ℃显色培养基中混匀或 涂布于平板上
3 、 36 ± 1 ℃ 培养 18 ～ 24h ，选用有 30 ～ 200 个菌落的平板，计数平板上出现的典型大肠菌群菌落。大肠菌群典型菌落为蓝绿色，其它细菌为无色或黄色菌落。
总大肠菌群 = 蓝绿色菌落
4 、对可疑大肠菌群菌落可划线接种到营养琼脂平板上， 36 ± 1 ℃ 培养 12-16 小时，挑取单菌落做大肠菌群 BGLB 发酵试验。
质量控制
1 、外观
此干燥培养基的粉末均匀，具有良好的流动性，呈乳白色。制备好的平板呈透明无色固体培养基。
2 、微生物试验
在 36 ± 1 ℃ 培养 18 ～ 24h 小时：
质控菌株 ATCC 生长情况 菌落颜色
单增李氏菌 27853 -/+ 无色
金黄色葡萄球菌 25923 -/+ 无色
大肠杆菌 25922 +++ 蓝色
沙门氏菌 +++ 无色
大肠菌群 +++ 蓝色
方法的局限性
本培养基鉴定 大肠菌群 ，少数情况下可能会出现假阳性，但不会出现假阴性，有时可能需做其它补充试验。
典型特征
大肠菌群典型菌落为蓝绿色，其它细菌为无色或黄色菌落。
如果要采购的话在青岛海博商城里也有 http://www.hopebiol.com/shop52/
❸ 大肠杆菌菌落照片及菌落特征
大肠杆菌菌落照片如图
大肠杆菌在普通琼脂培养基上面都是一样的，圆形边缘整齐，表面光滑，半透明，小凸起；典型的大肠杆菌在伊红美蓝琼脂平板上的特征为：深紫黑色、光滑、湿润、带有金属光泽的圆形菌落。
大肠杆菌为短杆菌，两端呈钝圆形，革兰阴性。有时因环境不同，个别菌体出现近似球杆状或长丝状 ；大肠杆菌多是单一或两个存在，但不会排列呈长链形状。
大多数的大肠杆菌菌株具有荚膜或微荚膜结构，但是不能形成芽孢；多数大肠杆菌菌株生长有菌毛，其中一些菌毛为针对宿主及其他的一些组织或细胞具有黏附作用的宿主特异性菌毛。
(3)菌落实验步骤图片扩展阅读
大肠杆菌的生化代谢非常活跃。大肠杆菌可以发酵葡萄糖产酸、产气，个别菌株不产气，大肠杆菌还能发酵多种碳水化合物，也可以利用多种有机酸盐。大肠杆菌在常用的生化特性检测项目中，甲基红试验呈阳性，吲哚产生和乳糖发酵是阳性（个别菌株表现阴性），维-培试验是阴性。
尿素酶和柠檬酸盐利用呈阴性（极个别菌株表现阳性），硝酸盐还原试验表现阳性，氧化酶表现阴性，氧化-发酵试验表现为F型。
❹ 菌落长啥样
在固体培养基上（内）以母细胞为中心的一团肉眼可见的、有一定形态、构造等特征的子细胞的集团。生长在固体培养基上，由单个细胞繁殖形成的、肉眼可见的细菌群体。将分散的细胞或孢子接种到培养基上，在适宜条件，使其生长繁殖。由于细胞受到固体培养基表面或深层的限制，子代菌体常以母细胞为中心聚集在一起，形成具有一定形态结构的子细胞群体。各种微生物在一定条件下形成的菌落特征（如大小、形状、边缘、表面、质地、颜色等）具有一定的稳定性，是衡量菌种纯度、辨认和鉴定菌种的重要依据。菌落特征与微生物的菌体形态结构特征密切相关。例如细菌、酵母菌不形成菌丝，其菌落仅生长在固体培养基表面，可用接种工具将其全部挑起，即与培养基结合不紧密；而放线菌、霉菌的菌体大多分化为营养菌丝与繁殖菌丝，其营养菌丝深入培养基中吸取营养，故具有与培养基结合较紧，不易挑起等特征。
如果把培养基比作海的话那么一个个岛屿就是一个个菌落
ttc不是用来鉴别微生物生死的么变浅可能是你那个培养基里的微生物染了杂菌或者培养的微生物过了稳定期开始大面积死亡了，你可以取样在培养一次多放点养料试试
❺ 细菌培养的过程，从冷冻的菌 到摇瓶实验 经过几个步骤最好详细点
复苏 平板划线培养 挑单菌落 中试管扩增 摇瓶扩增
1.复苏：根据所培养的细菌选择适宜的培养基，大部分细菌在LB培养基中在超净工作台先用1毫升左右的适宜的培养基溶解冷冻菌，然后转移到10毫升中试管（放入4毫升液体培养基）中，一般在37摄氏度摇床静止或低转速培养12小时或者过夜（温度取决于所培养的细菌适宜生长的温度）。
2.平板划线培养：在平板（琼脂+液体培养基）划线，放37摄氏度培养箱培养箱中倒置培养6小时~12小时，在平板上观察是否形成了单菌落.
3. 挑单菌落：在超净台中挑选典型单菌落，置入10毫升中试管（内有5毫升液体培养基）中，在37摄氏度摇床，转速200转培养12小时或者过夜，肉眼能看到试管浑浊。
3.按照1：20的比例将中试管中的菌液移到250毫升三角瓶（放入100毫升液体培养基），，培养条件同前。注意：所有的接种操作均需要在层流罩中，培养基应无菌。
❻ 初二证明 手上有细菌 的生物实验. 详细过程、
1、取两只洁净的培养皿（灭菌处理）,在无菌环境中,将两个培养皿内铺上等量的培养基.
2、用手在其中一个培养基（1号皿）中按一下,另一培养基（2号皿）不作处理.
3、同时盖上两个培养皿,置于适宜的无菌环境中培养.
4、培养若干天后取出.若1号皿中有菌落出现,而二号皿中没有菌落,则证明手上有细菌；若两个皿内均有菌落,则实验失败,需重新进行试验.
希望能帮上你,欢迎追问~
❼ 食品中细菌总数和菌落总数是怎么样测定的
食品中细菌总数和菌落总数的测定方法如下：
平板培养计数法
实验方法原理
菌落总数是指食品经过处理，在一定条件下培养后，所得1 g或1 ml检样中所含细菌菌落总数。菌落总数主要作为判别食品被污染程度的标志，也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖的动态，以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。菌落总数并不表示样品中实际存在的所有细菌总数，菌落总数并不能区分其中细菌的种类，所以有时被称为杂菌数，需氧菌数等。 实验材料
琼脂培养基 食品检样
试剂、试剂盒
乙醇生理盐水氢氧化钠溶液
仪器、耗材
电热恒温培养箱、冰箱、恒温水浴锅、托盘、天平、电炉、吸管、广口瓶、三角瓶、玻璃珠、平皿、试管、试管架、酒精灯、均质器、乳钵、灭菌刀、剪刀、灭菌镊子、酒精、棉球、玻璃、蜡笔、登记薄
实验步骤
一、检验程序
菌落总数检验程序见图5—1
二、检样稀释及培养
1. 以无菌操作，将检样25 g(或25 mL)剪碎以后，放于含有225 mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预先置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内，经充分振摇或研磨做成1：10的均匀稀释液。固体检样在加入稀释液后，最好置灭菌均质器中以8 000 r／min—1 0000 r／mln的速度处理1 min做成1：10的均匀稀释液。
2. 用1 mL灭菌吸管吸取1：10稀释液1 mL，沿管劈徐徐注入台有9 mL灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内(注意吸管尖端不要触及管内稀释液，下同)，振摇试管混合均匀，做成1：100的稀释液。
3. 另取1 mL的灭菌吸管，按上项操作顺序作10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次，即换用1支1 mL灭菌吸管。
4. 根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计，选择2—3个适宜稀释度，分别在作10倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度的吸管移1mL稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度作两个平皿。
5. 稀释液移入平皿后，应及时将凉至46℃营养琼脂培养基[可放置在(45土1) ℃水浴锅内保温注入平皿15 mI一20 mL，并转动平皿位混合均匀，同时将营养琼脂培养基倾入加有1 mL稀释液(不含样品)的灭菌平皿内作空白对照。
6. 待琼脂凝固后，翻转平板，置(36土1) ℃恒温箱内培养(48土2) h取出板内菌落数目，乘以稀释倍数，即得I g(1 mL)样品所含菌落总数。
注意事项
1. 平板培养计数法只能检出生长的活菌，不能检出样品中全部的细菌数，总是比实际生存在食品中的细菌数要少，这是因为食品中存在多种细菌，它们的生活特性各异，不可能在统一培养条件下全部生长出来。但是，仍能借此评定整个食品被细菌污染的程度，所以目前一般食品的卫生检验中都普遍采用这种方法。
2. 平板菌落计数测定食品中的菌落总数，一般均采用中温培养，特别是已属于直接供食用的制成食品，因为这些食品卫生的要求，是严格防止消化道传染病病原菌和食物中毒病原菌污染，这些病原菌都属于嗜温性菌，因而测定细菌数时，采用中温培养是比较合理的。
❽ 汤圆大肠杆菌实验怎么做具体步骤
你要做的是大肠杆菌培养分离实验、还是大肠杆菌生长曲线测定，还是大肠杆菌菌群测定啊？
如果是大肠杆菌培养分离实验：
【实验目的】
1．利用液体培养基进行大肠杆菌的扩增
2．用固体平面培养基进行大肠杆菌的划线分离
3．了解微生物实验的操作原理和培养条件
【材料用具】
大肠杆菌菌种
装有固体培养基的、已灭菌培养皿；装有LB液体培养基的、已灭菌的250ml三角瓶封口膜和橡皮圈 酒精灯 接种环 镊子 装有酒精棉球的广口瓶 恒温培养箱 摇床
【操作流程】
灭菌消毒——划线接种——培养观察
【实验步骤】
1．接种前的准备
进行接种操作前，应先洗手，再用70%的酒精棉球擦拭双手和桌面。 待酒精挥发之后，再点燃酒精灯。
2．接种
（1）接种时的要求
接种过程要在酒精灯火焰附近完成，这是因为在火焰附近形成的上升气流能避免空气中的微生物落入培养基中。
接种环灭菌：将接种环在酒精灯火焰的外焰灼烧灭菌。对金属丝与柄部连接部位也要在火焰上穿梭1－2次。灼烧后的接种环温度较高，为避免烫死菌种，可将其接触培养基或培养容器的内壁冷却后再取菌种。
（2）将固体培养基表面的大肠杆菌菌种转入液体培养基培养
右手执接种环，在火焰上灭菌。用左手握住装有菌种的试管和液体培养基的三角瓶靠近酒精灯火焰，并用右手中指-无名指夹下试管口的棉塞、无名指-小指夹下三角瓶的封口膜，将试管口和三角瓶口在酒精灯的火焰上烧灼灭菌后，再将接种环伸入试管，接触培养基冷却后取菌种。将菌种转入三角瓶的液体培养基中；分别将三角瓶的封口膜和试管的棉塞复原，在封口膜上标记好接种人和接种日期。
（3） 将液体培养基中的大肠杆菌菌种转入固体培养基中划线分离 接种时应以左手持培养皿，在火焰旁用左手拇指、食指及中指使皿盖开启成一缝（培养皿盖不能开大，以避免杂菌落入），用灭菌过的接种环取少许菌种迅速送入培养皿内，在固体培养基的表面连续平行划线4－5条，将培养皿转动一定角度后，用接种环通过第1次划线的末端部分做第2次连续平行划线，然后再以同样方法依次操作。
划线时接种环应与培养基表面成30°左右，注意划线要轻，不可把培养基划破，也不要使接种环碰到培养皿边缘。
3．培养
（1）将接有菌种和液体培养基的三角瓶在摇床上振荡培养12h，温度控制在37℃左右。
（2）将划线后的固体培养基盖好，在培养皿盖上标记好接种人和接种日期，再将培养皿在37℃恒温培养箱中倒置培养12－24h。
倒置培养的原因是：恒温培养时，培养基中的水分会以水蒸气的形式蒸发，并在培养皿盖子内凝结成水滴，水滴如果滴落在培养基表面并扩散开来，则会使不同菌落中的菌随水扩散，很难再分成单菌落，达不到分离目的。
培养12－24h后，若在划线的末端出现不连续的单个菌落，表明菌种已被分离。
【实验记录】
请课代表将在37℃恒温培养箱中培养12－24h的培养结果用相机拍摄下来，传给任课教师。
❾ 检测不同环境中的细菌和真菌实验步骤
细菌和真菌的分布
作为自然界中微生物的细菌和真菌是我们肉眼看不见的，必须借助于一定的器械（显微镜），但是它们又是无处不在的。未了弄清楚它们的分布情况，特进行探究：
1、实验中要选取五套培养皿进行实验，一个做为对比，另外四个用来培养不同环境中的细菌，并且是在不同的环境中培养，以便得出细菌和真菌的生存条件。
2、实验所使用的培养皿要经过高温灭菌（让学生想一想是为什么），并且每一组的培养皿要在相同的环境条件下培养。也即是说要准备至少5套培养皿（每一个小组）。因为对比不同环境中的细菌与真菌的存在情况，是属于单因素比较，所以除了采样地点是变量外，进行微生物培养的条件等也要保持一致（温度、湿度等）。
3、经过高温处理后可以将培养皿上、培养基内混有的细菌或真菌的孢子等杀死（经过严格的高温灭菌的环境中是不可能有细菌和真菌存在的），这样就排除了实验外其他环境的污染。因此，在实验前不要盲目的打开培养皿，以防止细菌或真菌的孢子等落在培养基上，实验中用无菌棉棒的目的同样是为了防止棉棒上的微生物污染培养基。也就是说在接种的时候要注意污染。
4、在不同的环境中细菌的分布是不相同的，因此在采集菌种的时候要注意选择环境，做到要有一定的代表性。
5、接种好的培养基要放在特定的环境条件下进行培养。
（将对照组放在一定的环境中培养，将另外四组放在四个不同的环境中进行培养，以便研究细菌和真菌的生存条件，同时也可以思考我们在生活中用什么方法来防止细菌和真菌的污染；尤其是医院又以什么为标准来判断。）
6、在检测不同环境中的细菌和真菌时，每一个小组的成员要作好分工，以保证在规定的时间内做好观察与记录。同时也便于小组成员间的相互讨论以及小组之间的讨论。（分析细菌和真菌的生存环境，分布范围，多少等等）。
❿ “细菌培养”的具体培养步骤是什么
以光合细菌培养方法为例。光合细菌培养的方法，按次序分为容器、工具的消毒， 培养基的制备，接种和培养管理四个步骤。
（一）容器、工具的消毒参考、此处从略。
（二）培养基的制备
1．培养用水
如果培养的光合细菌是淡水种，菌种培养可用蒸馏水，生产培养可用消毒的自来水（或井水）配制。如果培养的光合细菌是海水种，则用天然海水配制培养基，注意在海水中加入磷元素时，不能用磷酸氢二钾，应用磷酸二氢钾，不然会产生大量沉淀。
2．灭菌和消毒菌种培养用的培养基应连同培养容器用高压蒸气灭菌锅灭菌。小型生产性培养可把配好的培养液用普通铝锅或大型三角烧瓶煮沸消毒。大型生产性培养则把经沉淀砂滤后的水用漂白粉（或漂白液）消毒后使用。
3． 培养基配制根据所培养种类的营养需要选择合适的培养基配方。按培养基配方把所需物质称量，逐一溶解，混合，配成培养基。也可先配成母液，使用时按比例加入一定的量即可。
（三）接种培养基配好后，应立即进行接种。光合细菌生产性培养的按种量比较高，一般为20%～50%，即菌种 母液量和新配 培养液虽之比为1∶4～1∶1，不应低于20%，尤其是微气培养，接种量更应高些，否则光合细菌在培养液中很难占绝对优势，影响培养的最终产量和质量。
（四）培养管理光合细菌的培养过程中，管理工作包括日常管理操作和测试，生长情况的观察、检查以及出现问题的分析处理等三个方面。